INTRODUÇÃO: O primeiro levantamento sobre cisticercose humana e identificação dos fatores de risco associados à transmissão, foram realizados em Lages, SC. MÉTODOS: Oitocentos e setenta e sete voluntários de regiões periurbana e rural foram entrevistados e forneceram informações demográficas e condições sanitárias e de saúde. Amostras de sangue foram coletadas por meio de punção digital em papel filtro entre agosto 2004 e maio 2005. Verificou-se que 850 amostras estavam adequadas para análise. No ELISA, utilizou-se o antígeno heterólogo liquido vesicular de Taenia crassiceps. Para assegurar a confiabilidade dos resultados de ELISA, foram pareadas 77 amostras de soro e sangue eluido do papel filtro. A confirmação do diagnóstico sorológico foi feita por immunoblot (IB) com glicoproteínas purificadas de Taenia crassiceps. RESULTADOS: A reatividade de IgG eluída de sangue em papel filtro mostrou-se compatível com a dos soros correspondentes. A triagem por ELISA de 850 indivíduos revelou 186 (21,9%) positivos. De 213 pessoas convidadas a colher soro para IB (186 ELISA positivo e 27 com amostras de sangue total inadequadas), compareceram 130. O IB foi positivo em 29 (3,4%) de 850 amostras. Houve correlação significativa entre IB positivo e a prática de criação de suínos e de horta caseira (p = 0,0364). CONCLUSÕES: ELISA com sangue total em papel filtro mostrou-se adequado para inquéritos populacionais para cisticercose. A transmissão da cisticercose humana na área estudada mostrou correlação com criação suína domestica e horta caseira. A prevalência obtida foi semelhante à relatada em áreas endêmicas da América Latina.

INTRODUCTION: Human serofrequency of antibodies against Taenia solium antigens was determined and risk factors for cysticercosis transmission were identified. METHODS: Individuals (n=878) from periurban and rural locations of Lages, SC, were interviewed to gather demographic, sanitary and health information. Interviews and blood sample collections by finger prick on Whatman filter paper were performed from August 2004 to May 2005. Observation determined that 850 samples were suitable for analysis and were tested by ELISA using vesicular fluid of Taenia crassiceps heterologous antigen. To ensure the reliability of the results, 77 samples of the dried blood were matched with sera. The reactive samples were submitted to a serum confirmatory immunoblot (IB) test using purified Taenia crassiceps glycoproteins. RESULTS: The ELISA results for the dried blood and serum samples were statistically consistent. ELISA was positive in 186 (21.9%) out of 850 individuals. A group of 213 individuals were asked to collect vein blood for IB (186 with positive result in ELISA and 27 with inappropriate whole blood samples) and 130 attended the request. The IB was positive in 29 (3.4%) out of 850 individuals. A significant correlation (p = 0.0364) was determined among individuals who tested positive in the IB assay who practiced both pig rearing and kitchen gardening. CONCLUSIONS: ELISA with dried blood eluted from filter paper was suitable for cysticercosis population surveys. In Lages, human infection was associated with pig rearing and kitchen gardening. The prevalence index was compatible with other Latin American endemic areas.

OBJETIVO: Determinar a relação entre a detecção de antígeno de Taenia (TA) no líquido cefalorraquidiano (LCR) e achados de ressonância magnética (RM) em pacientes com diagnóstico definitivo de neurocisticersose. MÉTODO: Sessenta e três pacientes com diagnóstico de NC foram submetidos a exame de RM e exame de LCR com pesquisa de antígeno de Taenia por método imunoenzimático. RESULTADOS: A detecção de TA foi positiva em 36 pacientes (57,1%). Um total de 836 lesões foram analizadas sendo 98,7% intraparemquimatosas, 50,4% dos cistos encontravam-se íntegros, 22,1% degenerados e 19,5% calcificados. Foi observada relação significativa entre a presença dos níveis de TA detectados com o número total dos cistos e também com o número de cistos íntegros. Não foi observada relação com cistos calcificados. CONCLUSÃO: (1) a detecção de TA permite o diagnóstico etiológico em formas transicionais na NC com imagem pouco característica; (2) em estágio evolutivo final de um cisticerco no sistema nervoso, este pode não aparecer na tomografia computadorizada ou RM sendo a presença do antígeno importante para confirmação diagnóstica; (3) a detecção do TA permite também o diagnóstico de NC nos casos em que as reações inumológicas são negativas; (4) a detecção do TA representa um marcador de atividade da doença nas formas epiléticas da NC.

OBJECTIVE: To determine the relationship between Taenia antigen (TA) detection in cerebrospinal fluid (CSF) and magnetic resonance imaging (MRI) findings in patients with definite diagnosis of neurocysticercosis (NC). METHOD: Sixty-three patients with definite diagnosis of NC were submitted to a MRI of the brain, and to a CSF examination, with a meticulous search for TA by ELISA. RESULTS: TA detection was positive in 36 patients (57.1%). A total of 836 lesions were analyzed, greatly within the cerebral parenchyma (98.7 of the lesions). Intact or non-degenerating cysts were the most common evolutive phase observed (50.4% of all lesions), 22.1% were degenerating cysts and 19.5% calcified cysts. We observed a significant relationship between TA levels detected and the total number of lesions and the number of non-degenerating cysts, but not with calcified lesions. CONCLUSION: According to our results, we propose at least four important types of contribution: (1) TA detection may allow etiologic diagnosis in transitional phases of NC, with non-characteristic images; (2) in final stages of evolution of cysticercoids in the CNS, lesions may not appear on CT or MRI, and TA detection may contribute to a definite etiologic diagnosis; (3) TA detection may permit diagnosis of NC in some patients with previous negative tests for antibody detection in CSF; (4) TA detection may represent an accurate marker of disease activity in the epileptic form of NC.

Seven swine were experimentally infected with Taenia solium eggs and blood samples from each animal were periodically collected. At the end of the experiment (t140) the animals did not show clinical aspects of cysticercosis or parasites in tongue inspection. All animals were slaughtered and cut into thin slices in searching for cysts. The number of cysts found in each animal varied from 1 to 85. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) tests for antibody (Ab) detection and for antigen (Ag) detection were performed, which presented respectively 71 and 57% of positivity. By immunoblot (IB), using 18/14(T. crassiceps Ag) or lentil-lectin-purified glycoproteins from T. solium Ag (LLGP) as Ag, five (71%) and six (86%) animals were positive, respectively. The association between Ag-ELISA with any IB (18/14 or LLGP) allowed the detection of all animals at 140 days post-experimental infection (days p.e.i.). The use of IB 18/14 combined to the Ag-ELISA allowed the detection of all animals since 70 days p.e.i., and the association between IB LLGP and Ag-ELISA allowed the detection of all animals since 112 days p.e.i. While all animals could be considered healthy by conventional screening tests, the use of immunoassays for detecting Ab and Ag showed better accuracy; therefore it would be more useful than usual clinical examination for screening cysticercosis in slightly infected pigs.

In order to evaluate the taeniosis-cysticercosis complex in a population of a peasants' settlement, located at Teodoro Sampaio, state of São Paulo, Brazil (longitude 52° 36'12 ", latitude 22° 17'12 ") a series of laboratory markers were determined. After signing an informed consent, participants answered a standardized questionnaire. To determine anti-Taenia solium cysticercus antibodies, the samples were tested by enzyme linked immunoabsorbent assay using 18-and 14-kDa antigen proteins from vesicular fluid of Taenia crassiceps (VF-Tcra). The reactive and inconclusive ELISA samples were tested by immunoblotting. Total IgE levels were determined by chemmiluminescence's assay and hemogram by flow cytometer flux counter. A total of 84 individuals, 5.9% presented anti-T. solium cysticercus antibodies in ELISA and 3.6% were strongly reactive in the 18/14 kDa immunoblotting confirmatory test. All of the individuals with positive antibodies showed elevated Total IgE levels. We conclude that the frequency of anti-T. solium cysticercus antibodies in this population is higher than other regions considered endemic in São Paulo. Thus, it is important to carry out surveys in Peasants' settlement areas with the objective of establishing public health measures for prevention and control of infectious diseases such as taeniosis-cysticercosis.

OBJETIVO: (1) Determinar a concentração de antígenos de Taenia no líquido cefalorraquidiano (LCR) em doentes com neurocisticercose; (2) estudar sua relação com a atividade clínica da doença e com as variáveis clássicas do LCR. MÉTODO: Em 36 pacientes com diagnóstico definido de neurocisticercose foi realizado exame do LCR, com estudo citológico e citomorfológico, exame bioquímico, reações imunológicas para cisticercose e detecção de antígenos de Taenia. Os anticorpos para detecção desses antígenos foram obtidos a partir da forma larvar da Taenia crassiceps, cepa ORF. Após a inoculação e proliferação intraperitoneal dessa forma larvária em ratas, foi imunizado um grupo de coelhos com seu líquido vesicular. RESULTADOS: Em 17 pacientes (47,2%) foi detectado antígeno de Taenia, especialmente naqueles com manifestação epiléptica nos últimos 12 meses. CONCLUSÃO: A detecção de antígeno de Taenia guarda relação significativa com a vigência de formas clinicamente ativas, sendo, nestas formas, marcador mais sensível que a eosinofilorraquia.

OBJECTIVE: (1) To determine the concentration of Taenia antigens in the cerebrospinal fluid (CSF) of patients with neurocysticercosis (NC); (2) to establish its relationship with clinical activity of the disease and with classical variables of CSF. METHOD: A CSF examination was performed in one sample from 36 patients with definitive diagnosis of NC, including: quantitative and cytomorphological study, biochemical tests, immunological reactions for cysticercosis and Taenia antigens. The antibodies for antigens detection were obtained from the larval form of Taenia crassiceps, ORF strain. After intraperitoneal passage through female mice, a group of rabbits was immunized with vesicular fluid antigens. RESULTS: The Taenia antigen was detected in CSF from 17 patients (47.2%), especially in those patients with epileptic symptoms in the last 12 months. CONCLUSION: Taenia antigens presence in CSF have significant relationship with clinically active forms of NC, being a more sensitive marker than the classic eosinophil presence.

Introdução: O diagnóstico da neurocisticercose (NCC) deve ser feito pela associação de técnicas de imagem com métodos imunológicos sensíveis e específicos. Objetivos: Avaliar os métodos Elisa e Western blot (Wb), utilizando-se como antígeno extrato bruto salino da larva da Taenia solium, o Cysticercus cellulosae e Wb, empregando-se como antígeno cisticercos da Taenia crassiceps em amostras de soro, para o diagnóstico da NCC. Materiais e métodos: Foram avaliadas amostras de soro de 43 pacientes com diagnóstico de NCC: 21 por clínica, tomografia computadorizada de crânio (TC) e presença de anticorpos anticisticerco no líquido cefalorraquiano (LCR); 22 por clínica e TC e 229 pacientes com diferentes parasitoses. Para as análises desses materiais biológicos foram empregados os métodos Elisa, usando-se como antígeno C. cellulosae, e Wb, usando-se como antígeno C. cellulosae e Cysticercus longicollis. Resultados: O método Elisa utilizando C. cellulosae como antígeno apresentou especificidade de 95% e sensibilidade de 71%. O método Wb utilizando C. cellulosae ou C. longicollis como antígeno apresentou sensibilidade de 86% e especificidade de 99%. Conclusões: Os métodos imunológicos no LCR são importantes para a definição da NCC. Entretanto o método Elisa no soro ainda não é adequado pela sua baixa sensibilidade, mas o Wb apresentou alta especificidade e boa sensibilidade, podendo auxiliar no diagnóstico da NCC, possibilitando sugerir a existência de forma transicional da doença, não demonstrada pela TC.

Background: The diagnosis of neurocysticercosis (NCC) has been made by association of neuroimaging studies and use of sensitive and specific serological assays. Objectives: Evaluating Elisa and Western blot (Wb) tests using a crude extract of Cysticercus cellulosae (Taenia solium) as antigen and a Wb test using a glycoprotein of Cysticercus longicollis (Taenia crassiceps) as antigen for the diagnosis of NCC. Methods: Serum samples from 43 patients with NCC: 21patients presenting clinical manifestations, cerebral computed tomography findings compatible with cerebral lesions and high levels of anti-cysticercus antibodies in cerebrospinal fluid (CSF); 22 patients with clinical manifestations and cerebral computed tomography findings compatible with cerebral lesions and serum samples from 229 patients with other parasitic infections were tested by Elisa standardized with crude extract of C. cellulosae and Wb standardized with glicoprotein of C. cellulosae and C. longicollis. Results: The Elisa test using crude extract of C. cellulosae showed specificity of 95% and sensibility of 71%. Both tests using glycoproteins of either C. cellulosae or C. longicollis showed specificity of 99% and sensibility of 86%. Conclusions: The use of immunological techniques for antibodies detection in CSF was shown to be an important tool for NCC diagnosis. However, detection of antibodies in serum lacked sensibility when Elisa was evaluated. The Wb assay in serum samples was sensitive and specific and it can be helpful for the diagnosis of the transitional form of NCC frequently not detected by cerebral computed tomography.

Se utilizó la técnica del inmunoblot para el diagnóstico de la cisticercosis porcina usando un antígeno total de cisticercos de Taenia crassiceps. Fueron analizados 13 sueros del cerdo con cisticercosis, 30 sueros controles negativos y ocho sueros del cerdo con hidatidosis, así como nueve del suino con macracantorincosis, 10 con ascaridiosis y ocho con pulmonía. El uso de este antígeno en el inmunoblot con suero de cerdos no se había publicado previamente. El inmunoblot fue padronizado por análisis de titulación en bloque mostrando 100.0% de sensibilidad y 96.7% de especificidad. Los péptidos específicos para la cisticercosis en orden de frecuencia fueron: 72-68 kD (100%), 16-15 kD (77%), 39-36 kD (62%), 18-17 kD (54%), 21 kD (31%), 14 kD (23%), 25-23 kD (8%), y 20-19 kD (8%). Reacción cruzada (72-68 y 18-17 kD) sólo se descubrió en una muestra (12.5%) de cerdo con hidatidosis. Debido a sus altas tasas de desempeño, el inmunoblot debe ser útil para confirmar el diagnóstico de cisticercosis porcina y es más eficaz que otras pruebas empleadas para este propósito, como examen de la lengua, examen anatomopatológico y ELISA

Foi padronizado o teste ELISA para o diagnóstico da cisticercose suína. Após confirmação por exame post-mortem, os soros dos respectivos animais foram empregados como controles positivos e negativos. Soros de suínos portadores de infecções heterólogas foram ensaiados para determinação de reações cruzadas. Os quatro antígenos testados na fase de padronização foram líquido vesicular (VF) e extrato total (T) de larvas de Taenia crassiceps (Tcra) e de extrato de escólex (S) e de cisticercos (T) de Taenia solium (Tso). A titulação em bloco das ótimas concentrações de antígenos e diluições de soros e de conjugado, bem como o emprego de Tween-20 e de leite desnatado nas soluções bloqueadora e de lavagem exerceram nítida influência no desempenho do teste ELISA. Todos os antígenos revelaram bom desempenho na diferenciação entre soros positivos e negativos para cisticercose. O antígeno VF-Tcra apresentou as mais altas taxas de desempenho, seguido do T-Tcra. As taxas de desempenho para o antígeno VF-Tcra foram, respectivamente, para pontos de corte com 2sd e 3sd, de 96,0% e 80,0% para sensibilidade e de 97,5% e 100,0% para especificidade. Foi detectada reação cruzada com soros de hidatidose e de ascaridiose. Considerando o bom desempenho observado, o teste padronizado pode ser recomendado em matadouros no diagnóstico de animais suspeitos e no levantamento da ocorrência da doença nos segmentos de criação, sobretudo nos clandestinos, dando suporte às medidas de controle da cisticercose, integradas em toda a cadeia de produção da carne suína, exercendo efetiva contribuição à Saúde Pública.

In the present study ELISA was standardized for the diagnosis of swine cysticercosis based on necropsy parameters and confirmed positive and negative control sera. Serum samples from pigs with other infections were also assayed to determine possible cross-reactions. Four antigens were assayed: from Taenia crassiceps vesicular fluid (VF-Tcra) and crude larvae extract (T-Tcra), and from Taenia solium extracts of scolex (S-Ts) and of larvae (T-Ts). A checkerboard evaluation of antigen, serum and conjugate dilutions, as well as the use of Tween-20 and skim cow milk in wash and blocking solution had a marked effect on improving ELISA performance. All the antigens showed a good performance, but VF-Tcra was the best, with 96.0% and 80.0% sensitivities for cut-offs respectively at 2sd and 3sd, and corresponding specificities of 97.5% and 100.0%. Cross-reactivity was observed only with hydatidosis and ascaridiosis. In view of the high performance observed, the ELISA test should be recommended for the diagnosis of cysticercosis in suspected swine in slaughterhouses and for the screening of cysticercosis in swine production. These results will support integrated measures of cysticercosis control throughout the chain of swine production, effectively contributing to public health.

Neurocisticercose (NC), causada pela presença da forma larvária de Taenia solium em tecidos, é a mais frequente e grave infecção parasitária que acomete o sistema nervoso central. Nós investigamos a presença de IgE total por quimiluminescência em 53 amostras pareadas de líquido cefalorraquiano (LCR) e soro de pacientes com NC (P) e 40 amostras de LCR de indivíduos portadores de outras desordens neurológicas como grupo controle (C). A detecção de IgE total mostrou 28,3% das amostras de LCR do grupo P com concentrações entre 1,2 UI/ml e 6,6 UI/ml (média = 1,4 UI/ml, desvio padrão-sd = 1,1 UI/ml), maiores que o grupo C (£1,0 UI/ml). As amostras de soro do grupo P mostraram concentrações entre 1,0 UI/ml e 2330,0 UI/ml (média = 224.1 UI/ml, sd = 452,1 UI/ml), e 32,1% das amostras apresentaram valores maiores que o valor normal citado pelo fabricante (<100,0 UI/ml). Diferença significativa foi encontrada entre as amostras de LCR dos grupos P e C (p = 0,005) e entre as amostras de soro do grupo P e valor de referência (p = 0,005), sendo os resultados dos soros mais frequentemente alterados.

Neurocysticercosis (NC), the presence of Taenia solium metacestodes in tissues, is the most frequent and severe parasitic infection of the central nervous system. We investigated the presence of total IgE by an automated chemiluminescence assay in 53 paired cerebrospinal fluid (CSF) and serum samples from patients with NC (P) and in 40 CSF samples from individuals with other neurological disorders as the control group (C). Total IgE concentration ranged from 1.2 to 6.6 IU/ml (mean = 1.4 IU/ml, standard deviation-sd = 1.1 IU/ml) in 28.3% of CSF samples from the P group, a value significantly higher than for the C group (£1.0 IU/ml). The serum samples from the P group showed concentrations ranging from 1.0 to 2330.0 IU/ml (mean = 224.1 IU/ml, sd = 452.1 IU/ml), which were higher than the normal value cited by the manufacturer (<100.0 IU/ml) in 32.1% of the samples. A significant difference was observed in CSF samples from the P and C groups (p = 0.005) and in serum samples from the P group compared to the normal value (p = 0.005), with sera showing more frequent abnormal results.

Analisamos amostras de líquido cefalorraquidiano (LCR), soro e saliva de pacientes com neurocisticercose, grupo de controle e indivíduos com outras parasitoses, por ELISA com antígenos de líquido vesicular de T. crassiceps (Tcra) e salino total de T. solium (Tso) para a pesquisa de anticorpos. A sensibilidade para IgG-Tcra foi 100% para LCR e soro e 32,0% para saliva, e para IgG-Tso 100% para LCR, 80,0% para soro e 24,0% para saliva. A especificidade foi de 100% para CSF e 80,0% para soro com ambos os antígenos, e 100% para saliva com Tcra e 87,5% com Tso. A sensibilidade e especificidade para IgA-Tcra foi, respectivamente: 40,0% e 100% para LCR, 36,0% e 97,1% para soro, e 4,0% e 90,0% para saliva. A pesquisa de IgE mostrou 24,0% de sensibilidade e 97,1% de especificidade para soro, sem detecção nas amostras de LCR. A pesquisa de anticorpos revelou a presença de IgG > IgA > IgE no LCR, soro e saliva, com presença de IgG em todas as fases evolutivas da doença, enquanto que IgA/IgE foram mais frequentes na forma inativa.

We assayed samples of cerebrospinal fluid (CSF), serum and saliva from patients with neurocysticercoses, control group and individuals with other parasitoses, by ELISA with Taenia crassiceps vesicular fluid antigen (Tcra) and Taenia solium total antigen (Tso) for the detection of antibodies. The sensitivity for IgG-Tcra was 100% for CSF and serum, and 32.0% for saliva; and for IgG-Tso 100% for CSF, 80.0% for serum and 24.% for saliva. Specificity was 100% for CSF and 80.0% for serum with both antigens, and 100% for saliva with Tcra and 87.5% with Tso. The sensitivity and specificity for IgA-Tcra was, respectively, 40.0% and 100% for CSF, 36.0% and 97.1% for serum, and 4.0% and 90.0% for saliva. IgE detection showed 24.0% sensitivity and 97.1% specificity for serum, with no detection in CSF samples. The search for antibodies revealed the presence of IgG > IgA > IgE in CSF, serum and saliva samples, with IgG being present in all phases of the disease, while IgA/IgE were more frequent in the inactive form.

O objetivo do presente estudo foi determinar a prevalência de determinadas espécies de micoplasmas, tais como, Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum e Mycoplasma penetrans, em swabs uretrais de pacientes infectados com HIV-1 comparando com um grupo controle. Micoplasmas foram detectados por técnicas padrão de cultivo e pela reação de polimerase em cadeia para a qual foram utilizados "primers" genéricos obtidos da região conservada 16SrRNA e "primers" específicos para Mycoplasma penetrans. A positividade obtida nos dois métodos foi comparável. Contudo, o PCR mostrou ser mais sensível nas condições empregadas enquanto que o cultivo permitiu a quantificação dos isolados. Os resultados demonstraram não haver diferenças significantes (p < 0,05) nas taxas de positividade entre os métodos empregados para a detecção dos micoplasmas.

The objective of the present study was to determine the prevalence of certain mycoplasma species, i.e., Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum and Mycoplasma penetrans, in urethral swabs from HIV-1 infected patients compared to swabs from a control group. Mycoplasmas were detected by routine culture techniques and by the Polymerase Chain Reaction (PCR) technique, using 16SrRNA generic primers of conserved region and Mycoplasma penetrans specific primers. The positivity rates obtained with the two methods were comparable. Nevertheless, PCR was more sensitive, while the culture techniques allowed the quantification of the isolates. The results showed no significant difference (p < 0.05) in positivity rates between the methods used for mycoplasma detection.

A detecção de IgE apresenta dificuldades técnicas pela reduzida concentração que se encontra no LCR e no soro. Utilizando método imunoenzimático com conjugado anti-IgE-fosfatase alcalina e substrato fluorigênico, foram estudadas 86 amostras de LCR de três grupos: A) 29 pacientes com NC, B) 36 pacientes com afecções neurológicas diversas (neurossífilis, neurotuberculose, meningites, tumores, hemorragias) e C) 21 indivíduos de pós-alta médica de meningites bacterianas. Os resultados obtidos foram: A) 0,05 a 3,00 Ul/ml (0,76±0,79), B) 0,00 a 1,50 Ul/ml (0,23±0,34) e C) 0,05 a 1,25 Ul/ml (0,34±0,34). Os resultados obtidos sugerem que a IgE parece ter papel na patogenia da NC e esforços devem ser feitos para padronização de teste para detecção de anticorpos IgE específicos.

The detection of IgE is technically difficult because of its reduced concentrations in serum, and even lower concentrations in cerebrospinal fluid (CSF). In the present investigation we studied 86 CSF samples using an immunoenzymatic method with an anti-IgE-alkaline phosphatase conjugate and a fluorigenic substrate. The samples were from three groups: A) 29 patients with neurocysticercosis (NC), B) 36 patients with different neurologic disorders (neurosyphilis, neurotuberculosis, meningitis, tumors, hemorrhage) and C) 21 discharged individuals who had been hospitalized for bacterial meningitis. The results obtained were: A) 0.05 to 3.00 IU/ml (0.76±0.79), B) 0.00 to 1.50 IU/ml (0.23±0.34) and C) 0.05 to 1.25 IU/ml (0.34±0.34). The present results suggest that IgE appears to play a role in the pathogeny of NC and that efforts should be made to standardize a test for the detection of specific IgE antibodies.

Foi desenvolvido o teste dot-ELISA para detecção de anticorpos em líquido cefalorraquiano (LCR) no diagnóstico imunológico da neurocisticercose humana, utilizando antígenos de membrana e escólex de Cysticercus cellulosae (M+E-Cc) e, alternativamente, membrana (M) e líquido vesicular (LV) de Cysticercus longicollis (Cl) covalentemente ligados a um novo suporte constituído de tecido de poliéster-resina de N-metilol-acrilamida (dot-TR). O teste foi realizado à temperatura ambiente, com tempos de incubação reduzidos e sem necessidade de cuidados na manipulação do suporte. A sensibilidade obtida foi de 95,1% para o antígeno Cc e 97,6% para o Cl. A especificidade foi de 90,6% quando o antígeno Cc foi usado, e 96,9% e 100% para M-Cl e LV-Cl, respectivamente. Não foi observada diferença significativa entre os antígenos homólogo e heterólogo. O baixo custo e a fácil execução do teste dot-TR empregando extratos antigênicos de Cysticercus longicollis indicam que pode ser empregado como alternativa no imunodiagnóstico da neurocisticercose humana.

A dot-ELISA was developed for the detection of antibodies in CSF in the immunologic diagnosis of human neurocysticercosis, using antigen extracts of the membrane and scolex of Cysticercus cellulosae (M+S-Cc) and, alternately, membrane (M) and vesicular fluid (VF) of Cysticercus longicollis (Cl) covalently bound to a new solid phase consisting of polyester fabric treated with N-methylol-acrylamide resin (dot-RT). The test was performed at room temperature, with reduced incubation times and with no need for special care in the manipulation of the support. The sensitivity rates obtained were 95.1% for antigen Cc and 97.6% for antigen Cl. Specificity was 90.6% when Cc was used, and 96.9% and 100% when M-Cl and VF-Cl were used, respectively. No significant differences in titer were observed between tests carried out with homologous and heterologous antigens. The low cost and easy execution of the dot-RT test using antigen extracts of Cysticercus longicollis indicate the test for use in the immunodiagnosis of human neurocysticercosis.

Reagente novo destinado ao teste de hemaglutinação indireta, THAI IAL, foi padronizado, utilizando hemácias de ganso, como suporte inerte, para o diagnóstico de campo da tripanosomíase americana. O objetivo foi o de substituir o reagente liofilizado ou congelado de THAI produzido rotineiramente, empregando hemácias humanas, no Instituto Adolfo Lutz (São Paulo, Brasil). O reagente padronizado apresentou longa estabilidade em suspensão líquida, e foi avaliado em 137 amostras de soros de pacientes chagásicos e não chagásicos, em THAL IAl. O desempenho diagnóstico deste teste foi semelhante ao de THAI utilizando hemácias humanas e ao de THAl de procedência comercial. A sensibilidade foi 1,00, especificidade 0,98, valores de preditivo positivo 0,96, e negativo 1,00. As diferentes partidas de reagente sucessivamente produzidas demonstraram ser reprodutíveis em método de controle de qualidade. O novo reagente é mais econômico que o anterior, de fácil preparo e aplicável aos estudos soroepidemiológicos.

A new reagent was designed to the indirect hemagglutination test (IHAT IAL), utilizing goose red blood cells as inert matrix and standardized for the field diagnosis of American trypanosomiasis. The objective was to substitute the tyophilized or frozen reagent of IHAT produced routinely using human erythrocytes in the Adolfo Lutz Institute (São Paulo/Brazil). The standardized reagent presented a long stability in liquid suspension, and was evaluated in 137 serum samples from patient with and without Chagas disease, by IHAT ILA. The diagnostic performance of this lest was similar to the IHAT utilizing human erythrocytes and to that of a commercial IHA Tkit. The sensitivity was 1.00, specificity 0.98, predictive value of positive 0.96 and of negative 1.00. Different batches of reagent successively produced proved to be reproducible in a quality control method. The new reagent is more economic than the former reagent, it can be produced easily and may be applicable to the seroepidemiologic studies.

Com a finalidade de melhorar o diagnóstico da leptospirose humana, padronizou-se o teste dot-ELISA para a pesquisa de anticorpos específicos da classe IgM na saliva. Empregaram-se amostras de saliva e soro coletadas simultaneamente de 20 pacientes com a forma ictero-hemorrágica da doença, de 10 pacientes com outras patologias e 5 controles negativos. Culturas de Leptos-pira em meio EMJH, dos sorovares: icterohaemorrhagiae, canicola, hebdomadis, brasiliensis e cynopteri, foram utilizadas como antígeno, na concentração proteica individual de 0,2 µg/µl, misturadas em volumes iguais. Na fase sólida do teste empregou-se tecido de po-liéster impregnado com resina de N-metilol-acrilamida. O volume do antígeno para cada teste foi de 1µl, o de saliva 8µl, o de conjugado anti-IgM humana marcada com peroxidase, de 30µl. A leitura foi visual, após revelação em solução cromógena de preparo recente. O suporte de tecido é de fácil obtenção e manuseio, diferente do clássico de membrana de nitrocelulose. A saliva pode ser coletada diretamente sobre o suporte, o que facilita o método e diminui gastos e riscos inerentes à coleta e processamento do sangue.

In order to improve the diagnosis of human leptospirosis, we standardized the dot-ELISA for the search of specific IgM antibodies in saliva. Saliva and serum samples were collected simultaneously from 20 patients with the icterohemorrhagic form of the disease, from 10 patients with other pathologies and from 5 negative controls. Leptospires of serovars icterohaemorrhagiae, canicola, hebdomadis, brasiliensis and cynopteri grown in EMJH medium and mixed together in equal volumes, were used as antigen at individual protein concentration of 0.2 µg/µl. In the solid phase of the test we used polyester fabric impregnated with N-methylolacrylamide resin. The antigen volume for each test was 1µl, the saliva volume was 8 µl, and the volume of peroxidase-labelled anti-human IgM conjugate was 30 µl. A visual reading was taken after development in freshly prepared chromogen solution. In contrast to the classic nitrocellulose membrane support, the fabric support is easy to obtain and to handle. Saliva can be collected directly onto the support, a fact that facilitates the method and reduces the expenses and risks related to blood processing.